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傳統(tǒng)的微小核糖核酸(miRNA)檢測(cè)技術(shù)主要包括Northern印跡法、實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄PCR、微陣列芯片法、測(cè)序等,然而均存在一些固有的缺點(diǎn)或不足。紙張作為用途廣泛的天然高分子材料,具有成本低、柔韌性高、便攜性好、可生物降解等諸多特點(diǎn)。紙基比距傳感器作為一類新興的即時(shí)檢測(cè)(POCT)裝置,是圍繞紙基材料的功能化設(shè)計(jì)的,根據(jù)待測(cè)目標(biāo)觸發(fā)反應(yīng)產(chǎn)生的可觀測(cè)距離信號(hào)進(jìn)行定性或定量分析,具有讀數(shù)直觀且操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。
近期,蘇州醫(yī)工所繆鵬課題組結(jié)合鏈置換策略開發(fā)了一種基于可編程DNA水凝膠的紙基比距傳感器。如圖1所示,目標(biāo)miRNA引發(fā)的鏈置換聚合反應(yīng)能夠生成大量的單鏈DNA,用于與另一條序列雜交并協(xié)助DNA水凝膠的組裝。該體系在紙基條帶上的浸潤(rùn)距離可用于反映目標(biāo)miRNA的濃度。實(shí)驗(yàn)采用蘇州醫(yī)工所自主研發(fā)的驗(yàn)證并優(yōu)化了DNA水凝膠的形成及反應(yīng)參數(shù)。紙基傳感器通道上流動(dòng)距離的變化與DNA水凝膠的粘度(組裝程度)密切相關(guān),根據(jù)反應(yīng)溶液沿條帶流動(dòng)的數(shù)學(xué)模型,對(duì)紙基傳感器的通道寬度、樣品量、反應(yīng)時(shí)間以及DNA水凝膠的制備條件進(jìn)行了全面的優(yōu)化。在相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)參數(shù)下,進(jìn)行了miRNA定量、選擇性檢驗(yàn)及臨床樣品測(cè)試,相應(yīng)結(jié)果與實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄PCR得出的結(jié)果高度一致。
該方法不僅靈敏度高,而且具有操作方便、成本低等優(yōu)點(diǎn),能夠滿足即時(shí)檢測(cè)的要求,在生物學(xué)研究和臨床疾病診斷方面顯示出巨大的應(yīng)用潛力。
來源:傳感器專家網(wǎng)